A környezeti tényezők hatása az autizmus zavar előfordulására 1979 után

Szerzők: Theresa A. Deisher, Ngoc V. Doan, Angelica Omaiye, Kumiko Koyama és Sarah Bwabye
Intézmény: Sound Choice Pharmaceutical Institute, 1749 Dexter Ave N, Seattle, WA 98109, USA
Kapcsolattartó szerző: Theresa A. Deisher

Elfogadva: 2014. július 9.
DOI:10.5897/JPHE2014.0649
ISSN:2006-9723
Folyóirat: Journal of Public Health and Epidemiology
Cikk száma: C98151247042
Copyright © 2014
A szerzők fenntartják a cikk szerzői jogait.
Weboldal:http://www.academicjournals.org/JPHE

Absztrakt

A tanulmány célja egy eddig figyelmen kívül hagyatott, univerzálisan bevezetett környezeti tényező, a gyermekkori vakcinákban található magzati és retrovírus szennyeződések vizsgálata volt, amelyek az autizmus zavar (AD) előfordulási gyakoriságának változási pontjai (CPs) előtt nem voltak jelen, és amelyek dózis-hatás összefüggést mutatnak, valamint ismert patológiai hatásmechanizmusokkal rendelkeznek. A kutatás világszintű populáció alapú kohorsz vizsgálati dizájnt alkalmazott, az Egyesült Államok, Nyugat-Ausztrália, az Egyesült Királyság és Dánia adataival. A vizsgálatba bevonták az 1970. január 1. után született, autizmus zavarral később diagnosztizált csecsemőket, akiknek oltási és diagnosztikai adatai nyilvánosan elérhető adatbázisokban szerepelnek. Az élő születéseket az apa életkora szerint csoportosították az Egyesült Államok és Ausztrália adatai alapján. Az MMRII, Varicella és Hepatitis A vakcinával oltott gyermekek 19-35 hónapos korukban kapták az oltásokat. Az autizmus zavar születési év szerinti változási pontjait az alábbiak szerint azonosították: 1980.9, 1988.4 és 1996 az Egyesült Államokban, 1987 az Egyesült Királyságban, 1990.4 Nyugat-Ausztráliában, és 1987.5 Dániában. Ezek a változási pontok egybeesnek az emberi magzati sejtvonalon gyártott vakcinák bevezetésével vagy dózisnövelésével, míg az apa életkora vagy a DSM (Diagnostic and Statistical Manual) revíziói nem mutattak összefüggést az autizmus zavar diagnózisával. Továbbá, a lineáris regresszió elemzés jelentős korrelációt mutatott a Varicella és Hepatitis A oltási lefedettség és az autizmus zavar esetei között. Az R szoftvert használták a változási pontok kiszámítására. Az autizmus zavar változási pontjai egybeesnek az emberi magzati sejtvonalon gyártott, magzati és retrovírus szennyeződéseket tartalmazó vakcinák bevezetésével a gyermekkori oltási programokba. Ez a minta megismétlődött az Egyesült Államokban, az Egyesült Királyságban, Nyugat-Ausztráliában és Dániában. Így az autizmus zavar előfordulásának növekedése közvetlenül összefügg az emberi magzati sejteken gyártott vakcinákkal. Az apa életkorának növekedése és a DSM revíziók nem álltak kapcsolatban az autizmus zavar előfordulásának növekedésével.

Kulcsszavak: Autizmus zavar, változási pont, vakcina, apa életkora.

Bevezetés

Az autizmus zavar (AD) az autizmus spektrum zavarok (ASD) egyik alcsoportja, amely olyan fejlődési rendellenességeket foglal magában, amelyek járványos méreteket öltöttek. Világszerte 1988-at azonosította az Egyesült Államok Környezetvédelmi Hivatala (EPA) az autizmus zavar szempontjából kritikus incidens évként (McDonald, 2010). A CDC (Betegségellenőrzési és Megelőzési Központ) 2013-ban közzétett tanulmánya szerint az Egyesült Államokban az ASD előfordulása 1:50 arányú a 6-17 éves gyermekek körében 2011-2012-ben. Az ASD mellett más korai kezdetű neurodevelopmentális (ND) szindrómák, például a gyermekkori skizofrénia (0,4%-os prevalencia) (Okkels et al., 2012) és a bipoláris zavar (Leibenluft, 2008) is járványos méreteket öltöttek. A gyermekkori ND járványok közös jellemzői közé tartozik a férfi nemhez való társulás, a csökkent reproduktív alkalmasság, az idősebb apa életkor és a de novo genommutációk fokozott aránya. Jelenleg az idősebb apa életkora a legelterjedtebb magyarázat a világszintű autizmus járványra. Az autizmus spektrum és más ND betegségekkel kapcsolatos új koncepciók azonban azt sugallják, hogy ezek a betegségek „többütéses” jellegűek, genetikai, genomikai és környezeti tényezők hozzájárulásával. A családi exomszekvenálásból származó bizonyítékok a ritka, változatos, de novo mutációk (DNM) fontosságát hangsúlyozzák a gyermekkori ND betegségekben (Van Den Bossche et al., 2012; Robinson, 2010; Awadalla et al., 2010; O’Roak et al., 2011; De Ligt et al., 2012; Girard et al., 2011; Xu et al., 2012).

A de novo mutációk ezekben a betegségekben következetesen az exontartományokban vagy a gének kritikus kódoló régióiban találhatók, amelyek korai stopkodonokat vagy nem működő fehérjéket eredményeznek (Awadalla et al., 2010; O’Roak et al., 2011; De Ligt et al., 2012; Luo et al., 2012). Az ND betegségekkel rendelkező gyermekeknél a de novo mutációk mellett a de novo genomi inszerciók és deléciók is jelentősen megnövekedtek az értelmi fogyatékosságban (De Ligt et al., 2012), az autizmus zavarban (O’Roak et al., 2011) és a gyermekkori skizofréniában (Xu et al., 2012). A változatos, ritka DNM-ek arra utalnak, hogy a genom instabilitást okozó környezeti tényezőket értékelni kell ezekkel a betegségekkel kapcsolatban.

A lehetséges környezeti kiváltó okok mérlegelése statisztikai értékelést igényel az autizmus előfordulási arányának növekedésével összefüggő születési év változási pontok (CPs) azonosítására. Egy környezeti tényezőnek a következő követelményeknek kell megfelelnie a betegség kiváltó okaként: (1) a változási pont előtt hiányzik vagy alacsonyabb szinten van jelen, (2) a változási pont után folyamatosan nő (dózis-hatás), (3) biológiai mechanizmusa összhangban áll a patológiával, és (4) az olyan nem földrajzilag korlátozott betegségek esetén, mint az autizmus, a skizofrénia és az értelmi fogyatékosság, szinte univerzális expozíciónak kell lennie (McDonald, 2010). Ez a tanulmány egy eddig figyelmen kívül hagyatott, univerzálisan bevezetett környezeti tényezőt vizsgál, a gyermekkori vakcinákban található magzati és retrovírus szennyeződéseket, amelyek az autizmus zavar előfordulási gyakoriságának változási pontjai előtt nem voltak jelen, és amelyek dózis-hatás bizonyítékokkal és ismert patológiai hatásmechanizmusokkal rendelkeznek. A vakcinák hatalmas előnyökkel jártak a világ számára; azonban a magzati gyártású vakcina szennyeződések, mint az autizmus zavar jelenlegi járványának környezeti tényezőjének további vizsgálata szükséges.

Módszertan

Korábban publikált autizmus zavar adatokat használtak fel, amelyek nagy populációkból származnak és elegendő időtartamot fednek le a változási pont elemzésekhez. A DSM revíziókhoz a változási pontokat a vakcina FDA jóváhagyásának éve és a DSM revízió publikálásának hónapja vagy éve alapján jósolták meg, és összehasonlították a statisztikailag kiszámított autizmus zavar változási pontokkal.

Adatforrások

Az ASD diagnosztikai kritériumainak kiszélesedése megnehezíti a jelenlegi járvány értelmezését. Ezért az autizmus zavarra (korábban infantilis autizmusnak nevezték) koncentráltunk, amely az ASD legsúlyosabb formája, és az elmúlt öt évtizedben viszonylag állandó diagnosztikai kritériumokkal rendelkezik, annak ellenére, hogy a nómenklatúra változott a gyermekkori skizofréniától az autizmus zavarig (McDonald, 2010). Az autizmus zavar feltételezett diagnosztikai enyhülésének objektív értékelésére a DSM kiadások nyomtatási dátumait a szerzői jogi oldalon található adatok alapján gyűjtöttük össze. A nyomtatási dátumok jelzik, hogy milyen gyorsan terjedtek el a diagnosztikai kritériumok változásai a szakmai közösségben. Annak meghatározására, hogy a DSM revíziók összefüggenek-e az autizmus zavarral, az egyes DSM revíziók nyomtatási dátumai alapján várt autizmus zavar születési év változási pontokat jósoltunk meg. Ha a DSM revíziók okoznak autizmus zavar változási pontot, akkor a várt születési év változási pontok összhangban állnának a statisztikailag kiszámított változási pontokkal.

Eredmények

Autizmus zavar változási pont elemzés

A szegmentált vonalillesztési elemzés három változási pontot azonosított az Egyesült Államok IDEA és CA DDS autizmus zavar adataiban az 1970-2002 közötti születési évekre: 1980.8, 1988.4 és 1995.6/1996.5. Az IDEA adatok hokibot-elemzése az 1973-1987 közötti születésű 19 évesekre vonatkozóan 1980.8-as változási pontot azonosított, amelyet az EPA korábban nem publikált (McDonald, 2010). A CA DDS adatokhoz használt szegmentált vonalillesztés jobb illeszkedést mutatott, két változási ponttal (1980.9 és 1988.4), mint az EPA által használt hokibot-módszer, amely egyetlen változási pontot azonosított 1987.5-re. Az összesített adatok (1973-2002) három változási pontot mutattak (1980.8, 1988.4 és 1996.5), bizonyítva a szegmentált vonalillesztés robusztusságát. Az Egyesült Királyság (Északkelet-London) adatai 1987-es, Nyugat-Ausztrália 1990.4-es, Dánia pedig 1987.5-ös változási pontot mutattak.

Diagnosztikai és statisztikai kézikönyv (DSM)

Az első DSM (DSM I) 1952-ben jelent meg, azóta öt jelentős revízió történt: DSM II (1968), DSM III (1980), DSM III-R (1987), DSM IV (1994) és DSM IV-TR (2000). A DSM revíziók hatása az autizmus diagnosztizálására a diagnosztikai kritériumok változásainak jelentőségétől és a revíziók terjesztésének gyorsaságától függ. A DSM revíziók közötti összehasonlítás azt mutatja, hogy a diagnosztikai kritériumok főként az autizmus zavarra jellemző viselkedési példák számának növekedésében különböznek, de a diagnózishoz szükséges viselkedések száma állandó vagy nő, nem pedig enyhül. A DSM nyomtatási rekordok alapján a revíziók gyorsan elterjedtek, így a nyomtatási dátumokat használtuk a várt születési év változási pontok előrejelzésére. A várt változási pontok nem egyeztek a kiszámított autizmus zavar változási pontokkal, így a DSM revíziók nem valószínű, hogy az autizmus zavar előfordulásának elsődleges kiváltói lennének.

Az apa életkora és az autizmus zavar közötti összefüggés

Az Egyesült Államokban az 1960-as és 1970-es években az élő születések száma csökkent az apa életkorának minden csoportjában, majd 1978 után minden 30 év feletti csoportban nőtt. Azonban a 40 év feletti apák születési számai 1963-ban és 2001-ben hasonlóak voltak, mégis az autizmus zavar előfordulása 1963-ban 0,7/10 000, míg 2001-ben 79/10 000 volt. A lineáris regresszió elemzés nem mutatott összefüggést az apa életkora és az autizmus zavar között (R² = 0,1027). Nyugat-Ausztráliában az 1975-2011 közötti adatok szintén nem mutattak összefüggést (R² < 1).

Az emberi magzati sejtvonalon gyártott vakcinák jóváhagyása és az autizmus zavar változási pontok közötti összefüggés

Az Egyesült Királyságban az 1987-es változási pont a humán magzati sejtvonalon gyártott MMR vakcina 1988. októberi bevezetését követte. Dániában az 1987.5-ös változási pont az MMR vakcina 1987-es bevezetésével egyezett. Az Egyesült Államokban az 1980-1981-es változási pont a MeruvaxII és MMRII 1979. januári jóváhagyását követte, amelyek a WI-38 magzati sejtvonalon készültek. Az 1988.4-es változási pont a második MMRII dózis hozzáadásával és a Poliovax 1987-es bevezetésével függött össze. Az 1995.6-os változási pont a Varivax (varicella) vakcina jóváhagyásával és bevezetésével egyezett. Nyugat-Ausztráliában az 1990-es változási pont az MMRII 1989-es bevezetését követte.

Az autizmus zavar és a magzati sejtvonalon gyártott vakcinák lefedettsége közötti összefüggés

Az Egyesült Államokban az autizmus zavar előfordulása 1978 után kezdett emelkedni, és 2008-ig folyamatosan nőtt. A Varivax lefedettség 1995-ös jóváhagyása után lineárisan nőtt, elérve a 80%-os telítettséget. A Hepatitis A vakcina (Havrix) 1995-ös jóváhagyása után 1999-től 17 államban ajánlották, 2005-től pedig az ACIP oltási rendjébe került. A Varivax oltások és az autizmus zavar esetei közötti lineáris regresszió elemzés szignifikáns korrelációt mutatott (R² = 0,8774; P < 0,001), hasonlóan a Hepatitis A vakcináció és az autizmus zavar esetei között 2003-2008 között (R² = 0,6762; P < 0,001).

DNS-maradványok az emberi magzati sejtvonalon gyártott vakcinákban

A MeruvaxII (rubella) vakcinában jelentős mennyiségű humán ssDNS-t (142 ± 8 ng/üveg) és dsDNS-t (35 ± 10 ng/üveg) detektáltak, körülbelül 215 bázispár hosszúságú fragmentumokkal. A Havrix vakcinában ssDNS (301 ± 153 ng/üveg) és dsDNS (44 ± 24 ng/üveg) maradványokat találtak, több mint 48,5 K bázispár hosszúságú fragmentumokkal. A Varivax vakcina 2 mikrogramm dsDNS-t tartalmaz, de az ssDNS szintek és a DNS fragmentumok hossza nem ismert.

Vita

Az autizmus zavar előfordulása az Egyesült Államokban 1978 után kezdett emelkedni (Newschaffer és Gurney, 2005). Az EPA ajánlásai szerint a születési év változási pontok környezeti kiváltó okok mérlegelését indokolják (McDonald, 2010). E tanulmány három változási pontot azonosított: 1980.8, 1988.4 és 1996.5. A szigorúan autizmus zavarra fókuszáló adatok elemzése csökkentette a hibás diagnózisok hatását. Az autizmus zavar diagnózisok drámai növekedése jelentős közegészségügyi terhet jelent, így a környezeti kiváltó okok kritikus értékelése szükséges.

A DSM revíziók vizsgálata azt mutatja, hogy az autizmus zavar diagnosztikai kritériumai nem enyhültek, és a várt változási pontok nem egyeznek a kiszámítottakkal, így nem valószínű, hogy a DSM revíziók az autizmus zavar előfordulásának elsődleges kiváltói. Az apa életkorának szerepe szintén nem jelentős, mivel az 1960-as években az idősebb apák születési számai hasonlóak voltak a későbbi időszakokhoz, mégis az autizmus zavar előfordulása alacsony maradt 1978-ig.

1979-ben, az első autizmus zavar változási ponttal egybeesően, a vakcinagyártási változások humán magzati DNS fragmentumokat és retrovírus szennyeződéseket vezettek be a gyermekkori vakcinákba. Ezek a szennyeződések autoimmun reakciókat válthatnak ki, és ismert, hogy genomi inszerciókat és mutációkat okoznak. Az emberi magzati sejtvonalon gyártott vakcinák, mint a MeruvaxII, MMRII, Varivax, Havrix és Pentacel, HERVK retrovírus fragmentumokat is tartalmaznak, amelyek a skizofrénia, bipoláris zavar és autoimmun betegségek esetében is emelkedett szintet mutatnak.

Az emberi magzati sejtvonalon gyártott vakcinák minden szükséges kritériumnak megfelelnek az autizmus zavar elsődleges kiváltójaként: a változási pontok előtt nem voltak jelen, az expozíció azóta nőtt, és klinikailag dokumentált immunológiai és mutagén mellékhatásaik vannak. A Pentacel 2008-as jóváhagyása a 2, 4 és 6 hónapos korban történő oltásokkal hozzájárulhatott a regresszív autizmus korábbi megjelenéséhez.

Ez az első laboratóriumi és ökológiai tanulmány, amely az emberi magzati sejtvonalon gyártott vakcinák és az autizmus közötti kapcsolatot vizsgálta. További kutatások szükségesek a vakcinagyártás biztonságának biztosítására, különösen az állati alapú gyártási módszerekhez való visszatérés lehetőségének mérlegelésére.

Köszönetnyilvánítás

A kutatást a Murdock Charity Trust és adományozóink támogatták.

Etikai nyilatkozat

A tanulmányban használt adatok nyilvános adatfájlokból származnak, így az IRB jóváhagyástól mentesülnek a Nemzeti Emberi Alanyokat Védő Tanácsadó Bizottság (NHRPAC) iránymutatásai szerint (2002. január 28-29.).

Érdekütközés

A szerzők nem jelentettek érdekütközést.

Hivatkozások

1. Australian Bureau of Statistics (2013). Statisztikák. Elérhető: http://www.abs.gov.au/ausstats/abs@.nsf/web+pages/statistics?opendocument#from-banner=LN. Hozzáférés: április.
2. Awadalla P, Gauthier J, Myers RA, Casals F, Hamdan FF, Griffing AR, Côté M, Henrion E, Spiegelman D, Tarabeux J, Piton A, Yang Y, Boyko A, Bustamante C, Xiong L, Rapoport JL, Addington AM, DeLisi LE, Krebs MO, Joober R, Millet B, Fombonne E, Mottron L, Zilversmit M, Keebler J, Daoud H, Marineau C, Roy-Gagnon MH, Dubé MP, Eyre-Walker A, Drapeau P, Stone EA, Lafrenière RG, Rouleau GA (2010). A de novo mutációk közvetlen mérése autizmus és skizofrénia kohorszokban. American Journal of Human Genetics, 87: 316-324.
3. Cavagnaro AT (2003). Autizmus spektrum zavarok. A kaliforniai esetszám változásai. Frissítés: 1999-2002. Kaliforniai Egészségügyi és Szociális Szolgálatok Ügynöksége.
4. Centers for Disease Control and Prevention (1989). Kanyaró – Egyesült Államok, az első 26 hét. Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), 38: 863-866.
5. Centers for Disease Control and Prevention (2012a). Az Egyesült Államok létfontosságú statisztikái. Elérhető: http://www.cdc.gov/nchs/products/vsus.htm. Hozzáférés: 2012. szeptember.
6. Centers for Disease Control and Prevention (2012b). Létfontosságú statisztikai adatok: Születések. Elérhető: http://www.cdc.gov/nchs/data_access/Vitalstatsonline.htm#Births. Hozzáférés: 2012. szeptember.
7. Centers for Disease Control and Prevention (2012c). Nemzeti létfontosságú statisztikai rendszer. Elérhető: http://www.cdc.gov/nchs/births.htm. Hozzáférés: 2012. szeptember.
8. Centers for Disease Control and Prevention (2012d). Az Egyesült Államok oltási lefedettsége a Nemzeti Immunizációs Felmérés (NIS) alapján. Elérhető: http://www.cdc.gov/vaccines/stats-surv/nis/default.htm. Hozzáférés: 2012. szeptember.
9. De Ligt J, Willemsen MH, van Bon BW, Kleefstra T, Yntema HG, Kroes T, Vulto-van Silfhout AT, Koolen DA, de Vries P, Gilissen C, del Rosario M, Hoischen A, Scheffer H, de Vries BB, Brunner HG, Veltman JA, Vissers LE (2012). Diagnosztikai exomszekvenálás súlyos értelmi fogyatékossággal élő személyeknél. New England Journal of Medicine, 367: 1921-1929.
10. Frank O, Zheng C, Hehlmann R, Leib-Mösch C, Seifarth W (2005). Humán endogén retrovírus expressziós profilok skizofréniában és bipoláris zavarban szenvedő betegek agyában. Journal of Virology, 79: 10890-10901.
11. Freimanis G, Ejtehad HD, Ali HA, Veitch A, Rylance PB, Alawi A, Axford J, Nevill A, Murray PG, Nelson PN (2010). A humán endogén retrovírus-K (HML-2) szerepe rheumatoid arthritisben: vizsgálatok perifériás vér mononukleáris sejtjeiben. Clinical and Experimental Immunology, 161: 46-47.
12. O’Roak BJ, Deriziotis P, Lee C, Vives L, Schwartz JJ, Girirajan S, Karakoc E, Mackenzie AP, Ng SB, Baker C, Rieder MJ, Nickerson DA, Bernier R, Fisher SE, Shendure J, Eichler EE (2011). Exomszekvenálás sporadikus autizmus spektrum zavarokban súlyos de novo mutációk azonosítására. Nature Genetics, 43: 155-156.
13. Qian S (2010). Környezeti és ökológiai statisztikák R-rel. Boca Raton, FL: Chapman & Hall/CRC.
14. Robinson P (2010). Teljes exomszekvenálás de novo mutációk azonosítására sporadikus mentális retardációban. Genome Biology, 11: 144-146.
15. Sakamoto Y, Ishiguro M, Kitagawa G (1986). Akaike információs kritérium statisztikák. Dordrecht, Hollandia: D. Reidel Publishing Company.”

Forrás: https://academicjournals.org/journal/JPHE/article-abstract/C98151247042